Połączona technika testu immunoabsorpcji enzymatycznej – w języku angielskim Enzyme-Linked Immuno Assay – lub test ELISA to test immunologiczny, który umożliwia wykrycie lub oznaczenie cząsteczek w próbce biologicznej. Został opracowany i opracowany przez dwóch szwedzkich naukowców, Petera Perlmanna i Evę Engvall z Uniwersytetu Sztokholmskiego w 1971 roku.

Cząsteczki badane metodą ELISA są na ogół białkami. Typy próbek obejmują płynne materiały biologiczne – osocze, surowicę, mocz, pot, podłoża do hodowli komórek lub rekombinowane białko – białko wytwarzane przez komórkę, której materiał genetyczny został zmieniony w wyniku rekombinacji genetycznej – oczyszczone do roztworu.

Test ELISA jest używany głównie w immunologii do wykrywania i/lub pomiaru obecności białek, przeciwciał lub antygenów w próbce. Ten test serologiczny wykrywa w szczególności przeciwciała wytwarzane przez organizm w odpowiedzi na zanieczyszczenie wirusem.

Zastosowanie przeciwciał do diagnozowania chorób zakaźnych stanowi specyficzną i szybką metodę. Technika ELISA to technika immunoenzymatyczna, która umożliwia wizualizację z próbki biologicznej reakcji między antygenem – ciałem uważanym za obce przez żywy organizm – a przeciwciałem za pomocą reakcji barwnej wytwarzanej przez marker enzymatyczny – ogólnie alkaliczna fosfataza i peroksydaza – wcześniej przyłączone do przeciwciała. Reakcja barwna potwierdza identyfikację wyizolowanej bakterii lub obecność pożądanego wirusa, a intensywność barwy wskazuje na ilość antygenów lub przeciwciał w danej próbce.

Istnieją cztery główne typy testu ELISA:

• ELISA bezpośredni, umożliwia wykrycie lub pomiar przeciwciał. Wykorzystuje tylko pierwotne przeciwciało;
• ELISA pośrednia, najszerzej stosowany, umożliwia również wykrywanie lub testowanie przeciwciał. Wykorzystuje drugorzędowe przeciwciało, które daje lepszą czułość niż bezpośredni test ELISA;
• ELISA w konkursie, umożliwia dawkowanie antygenów. Wytwarzany przez konkurencję o wiązania, nie wykorzystuje enzymu;
• ELISA «w kanapce», umożliwia dawkowanie antygenów. Ta technika jest powszechnie stosowana w badaniach.

Test ELISA służy do:

• Znajdź i zmierz przeciwciała w serologii do diagnozy chorób zakaźnych: wirusologia, parazytologia, bakteriologia itp.;
• Dawkowanie białek w niskich stężeniach: specyficzne dawki niektórych białek osocza (immunoglobulina E (IgE), ferrytyna, hormony białkowe itp.), markery nowotworowe itp.;
• Dawkowanie małych cząsteczek: hormonów steroidowych, hormonów tarczycy, leków…

Test ELISA służy w szczególności do diagnozowania wielu chorób zakaźnych:

Choroby przenoszone drogą płciową (STD)

W tym zapalenie wątroby, kiła, chlamydia i HIV. Zalecany przez służby zdrowia, jest głównym testem przesiewowym na AIDS: wykazuje obecność przeciwciał anty-HIV i antygenu p24 sześć tygodni po zakażeniu.

Choroby regionalne lub endemiczne

żółta gorączka, choroba wirusowa Marburga (MVM), Ladengue, borelioza, Chikungunya, gorączka doliny Rift, Ebola, gorączka Lassa itp.

Covid-19

Test ELISA, który należy przeprowadzić dłużej niż 2 do 3 tygodni po wystąpieniu objawów, umożliwia wykrycie w czasie krótszym niż godzina obecności przeciwciał anty-SARS-CoV-2.

Patogeny wirusowe wywołujące infekcje prenatalne

Na przykład toksoplazmoza, różyczka, cytomegalowirus, opryszczka pospolita.

Inne przypadki

Ale znalazł również zastosowanie w wykrywaniu:

• ciąże;
• Choroby autoimmunologiczne;
• Alergeny pokarmowe: ilościowe oznaczenie całkowitej immunoglobuliny E (IgE) pomaga w ocenie i leczeniu alergii;
• Zaburzenia hormonalne;
• Markery nowotworowe;
• Wirusy roślinne;
• I wiele więcej

W ramach wykrywania przeciwciał anty-SARS-CoV-2, pilotażowe badanie przeprowadzone w sierpniu 2020 r. przez Instytut Pasteura, CNRS, Inserm i Uniwersytet Paryski potwierdza wiarygodność testu ELISA: oba testowane testy ELISA całe białko N SARS-CoV-2 (ELISA N) lub zewnątrzkomórkowa domena kolca wirusa (S) jako antygeny docelowe. Ta technika umożliwiłaby identyfikację przeciwciał w ponad 90% przypadków, z bardzo niskim odsetkiem wyników fałszywie dodatnich wynoszącym 1%.

Testy Elisy, przeprowadzane na receptę lekarską w laboratoriach analitycznych, kosztują około 10 euro i są refundowane w 100% przez Ubezpieczenie Zdrowotne.

Przeprowadzane w bezpłatnych centrach informacyjnych, przesiewowych i diagnostycznych (CeGIDD), mogą być bezpłatne dla HIV i SARS-CoV-2.